儀（yí）器介紹

實驗目的：

檢測受（shòu）試物是否引起哺乳（rǔ）動物骨（gǔ）髓細胞染色體（tǐ）畸變,以評價受試物致突變的可能性

實驗概述：

染色體是細胞核中具有特殊結構和（hé）遺傳功能（néng）的小體,當化學物質作用於（yú）細胞周期G1期和S期時誘發染色體型畸變,而作（zuò）用於G2期時（shí）則誘發染色單體型（xíng）畸變。給試（shì）驗（yàn）的大、小鼠腹腔注入秋水仙素抑製細胞分裂時紡錘絲的形成,以增加中（zhōng）期分裂相細胞的比（bǐ）例,並使染色體絲（sī）縮短、分散、輪廓清晰。在顯微鏡下觀察染色體數目和形態。本（běn）方法特（tè）別適用於需考慮體內代謝活化後的染色體畸變分析（xī）。若有（yǒu）證據表明（míng）受試（shì）物或其代（dài）謝產物不能到達（dá）骨髓,則不適用於本方法，

應（yīng）用範圍

應用於（yú）科（kē）研、農業、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒（dú）效果研究等各個領域

符合標準：

GB/T 15670.16-2017《農藥登記毒理學試驗方法第16部分:體內哺乳動物骨髓細胞染（rǎn）色體畸變試驗》

二（èr）、試驗流程

1）動物選擇:常用齧齒（chǐ）類動物（wù）（大（dà）鼠或小（xiǎo）鼠），通常每組至少5隻/性別。

2）給（gěi）藥方案:

單（dān）次給藥:通常在采（cǎi）樣前12-48小時給藥（覆蓋細胞周（zhōu）期）

多次給藥:若（ruò）受試物代謝或毒性需重複暴露。

3.陽性對照:已知致畸變劑（如環磷酰胺）

4.陰性對照:溶劑（jì）對照（如生理鹽水或DMSO）

5.采樣（yàng）時間:通常在給藥後24小時和48小時采集骨髓細胞（覆蓋不同細胞周期階段）

6.染色體製備:

處死動物後取出骨（gǔ）髓細胞。

用秋（qiū）水仙素（sù）（Colchicine）處理，阻斷細胞（bāo）分裂於中期。低滲處理、固定、製（zhì）片並染色（如Giemsa染色（sè））

7.鏡檢分析:

觀察至少200個中期分裂相/動物（wù），記錄畸變類型和頻率，

區分染色體型畸（jī）變（如（rú）雙著絲粒體）和染色單體（tǐ）型畸變（如斷裂）

三、結果判定

1）劑量相關（guān）性:畸變率隨劑量增加而升高。

2）統計學差異:試驗組畸變率顯著高於（yú）陰性對照組(如p<0.05)

3）生物學意義:需結合曆史對照數據和（hé）畸變類型綜合評估。