一、 儀器介（jiè）紹

實驗目的：

本試驗是（shì）一（yī）項生殖細胞致突變試驗,用來檢測受試物（wù）對整體哺乳動物生殖細胞（bāo）的遺傳損傷,進一步確證體外試驗或其他（tā）試驗係統獲得的陽性結果,以（yǐ）評價受試物（wù）能否引起顯（xiǎn）性致死突變。

實驗概述：

哺乳動物發育中的精子在物理或化學因素作用（yòng）下（xià）,發生染色體損（sǔn）傷,從而使受精卵在發育中死亡引起（qǐ）顯性致死的染色體損（sǔn）傷主要為染色體斷裂。顯性致死的主要表現是受精卵著床前丟失或著床後胚

胎早期死亡。通過適當的途徑使雄性動物（wù）接（jiē）觸受試物,然後與未經染毒且未交配過的雌性動物（wù）交（jiāo）配,交配結束後（hòu）,取出雌性動物。雌（cí）性動（dòng）物於妊娠後半期處死（sǐ）,剖（pōu）開腹腔（qiāng）,取出（chū）子（zǐ）宮,檢査兩側子（zǐ）宮內（nèi）的胚胎植入數（著床數）、早死胎、晚死胎和活胎數。雄性動物每間隔一定時間再與另一（yī）批未經染毒且未交配過的雌性動物交配,如此共進行數批,以保證覆蓋一個精（jīng）子周期。

應用範圍

應用於科研、農業、衛生、教育、霧霾狀（zhuàng）態可吸入顆粒（lì）染（rǎn）毒效果研究等各（gè）個領域

符（fú）合標準：

GB/T 15670.18-2017《農藥登（dēng）記毒（dú）理學試驗方法第18 部分:齧齒類動物顯性致死試驗》

二、試驗流程

1）實驗動物：

物種: 通（tōng）常選用性成熟的健康雄性大鼠或小鼠（如SD大（dà）鼠、CD-1小鼠（shǔ））

數量: 每組至少15隻雄（xióng）鼠，設多個劑量組和陰（yīn）性/陽性對照組。

雌鼠: 需（xū）未（wèi）交配過的健康（kāng）雌鼠，用於與雄鼠交配。

2）給藥劑量（liàng）分（fèn）組:

至少設3個劑量組，高劑量應（yīng）出現輕微毒性（如體重減輕）。

陰性對（duì）照組如體重減輕（溶劑對照）和陽（yáng）性對照組（如環磷酰（xiān）胺、絲裂黴素C等已知致突變劑）

給藥方式:通常為（wéi）經口灌胃，連續給藥5~7天（覆（fù）蓋精子發生周期不同階段）

3）交配程（chéng）序

交配安排:雄鼠給藥（yào）後，按周次與未處理雌（cí）鼠交配（每周更（gèng）換一批雌鼠，共5~6批），以覆蓋精子發生全周期（精原細胞一精子）。

交配比例:通常1雄:2雌，每日檢查陰（yīn）栓（交配（pèi）證據）

4）觀察指標（biāo）：

胚胎存活分析

雌鼠妊娠中期解剖，計數黃體數、著（zhe）床（chuáng）數、活胎數和死胎數。

計算顯性（xìng）致死率:

其（qí）他（tā）指（zhǐ）標: 雄鼠體重、睾（gāo）丸重量、精子質量等,

5）結果評價：

陽性結果:顯性（xìng）致死率（lǜ）顯著升高（如劑量依賴性增加，或某批交配周（zhōu）期異常），提示受（shòu）試農藥可能誘發生殖細（xì）胞遺傳損傷。

陰性結果:需結合其他遺傳毒性試驗綜合評估。