儀器介紹

實驗目的：

檢測受試物是否引起哺乳（rǔ）動物骨髓細胞染色體（tǐ）畸變,以評價受試物致突變（biàn）的可能性

實驗概述：

染色體是細胞核中具有特殊結構和遺傳功能的小體,當化學物質（zhì）作用於細胞周期G1期（qī）和S期時誘發（fā）染色體型畸變,而作用於G2期時則誘發染色單體型畸變。給試驗（yàn）的大、小鼠腹腔注入秋水仙素抑製細胞分裂（liè）時紡錘絲的形成,以增加中期分裂相細胞（bāo）的比例,並使（shǐ）染色體絲縮短、分散、輪廓清晰。在顯微鏡下觀察染色體數目和（hé）形態。本方法（fǎ）特別適（shì）用於需考慮體內（nèi）代謝活（huó）化後（hòu）的染（rǎn）色體畸變（biàn）分析。若有證據表明（míng）受試物或其代謝產物不能到達骨髓,則不適用於本方法，

應用範圍

應用於科研、農業（yè）、衛生、教育、霧霾狀態可吸入（rù）顆粒染毒效果研（yán）究等各個（gè）領（lǐng）域

符合標（biāo）準：

GB/T 15670.16-2017《農藥（yào）登記毒（dú）理學試驗方法第16部分:體內哺乳動物骨（gǔ）髓細胞染色體畸變試驗》

二、試驗流程

1）動（dòng）物選擇:常用齧齒類動物（大鼠或小鼠），通常每組至少5隻/性別。

2）給藥方案:

單次給藥:通常在采（cǎi）樣（yàng）前12-48小時給藥（yào）（覆蓋細胞周期）

多次給（gěi）藥:若受試物代謝或（huò）毒性（xìng）需重複（fù）暴露。

3.陽性對照:已知致畸變劑（如環磷（lín）酰胺）

4.陰性（xìng）對照:溶劑對照（如生理鹽水或DMSO）

5.采樣（yàng）時間:通常在給藥後24小時和48小時采（cǎi）集（jí）骨髓細胞（覆（fù）蓋不同細（xì）胞周期階段）

6.染色體製備:

處死動物後取出骨髓細胞。

用秋（qiū）水仙（xiān）素（sù）（Colchicine）處理，阻斷細胞分裂於中期。低滲處理、固定、製片並（bìng）染色（sè）（如Giemsa染色）

7.鏡檢（jiǎn）分析:

觀察至少200個中期分裂相（xiàng）/動物，記錄畸變類型和頻率，

區分染色體型畸變（如雙著絲粒體）和染色單體型畸變（biàn）（如斷裂）

三、結果判（pàn）定

1）劑量相（xiàng）關性:畸（jī）變率隨劑量增（zēng）加而升高。

2）統計學差異（yì）:試驗（yàn）組畸變率顯著高於陰性對照（zhào）組(如p<0.05)

3）生（shēng）物學意義:需結合曆史對照數據和（hé）畸變（biàn）類型綜合評估。